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实验一 基本组织切片观察
2010-10-25 13:12  

 

【实验要点】

1、熟练使用光学显微镜。

2、掌握上皮组织的结构特点。

3、掌握单层柱状上皮、复层扁平上皮的形态结构。

4、熟悉疏松结缔组织的结构特点。

 5、熟悉各种血细胞的形态结构特点。

6、熟悉骨骼肌、心肌、平滑肌的形态结构特点。

7、掌握神经元的形态、结构特点。

【实验材料】

1、小肠切片、食管横切片、肾切片、气管切片、膀胱切片。

2、疏松结缔组织铺片和切片、血涂片、肌腱切片、脂肪组织切片、透明软骨组织切片、纤维软骨组织切片、骨磨片。

3、小肠横切片、骨骼肌切片、心壁切片。

4、脊髓横切片、指皮肤切片、肋间肌压片、脑(大或小脑)切片(特殊染色)。

【实验内容】

一、上皮组织

1、单层柱状上皮(小肠切片,HE染色)

1)肉眼观察:表面高低不平的一侧是小肠粘膜皱壁,表面为粘膜层,其表面呈紫蓝色的部分为上皮。

2)低倍镜观察:小肠腔面高低不平的突起为粘膜皱壁,在皱壁表面有许多突起为小肠绒毛,表面是单层柱状上皮。

3)高倍镜观察:上皮细胞呈柱状,排列紧密。细胞核呈椭圆形,靠近细胞基底部。细胞腔面一侧为游离面,与基底膜相连一侧为基底面。

4)高倍镜下绘图——单层柱状上皮,注明上皮细胞的游离面、基底面、细胞核和细胞质。         

2、复层柱状上皮(食管横切片,HE染色)

    1)肉眼观察:因食管腔面有数条纵行皱壁而使管腔呈不规则形,沿腔面着紫蓝色的一层即为复层扁平上皮。

    2)低倍镜观察:靠腔管面由多层细胞构成,各层形态不一,基底不平整,有许多乳头状突起伸入上皮。

3)高倍镜观察:自深部基底面一层细胞,体小,呈低柱状或立方形,细胞核卵圆形,染色较深,细胞界限不清。中部为数层较大的多角形细胞,细胞质染色浅,细胞界限清楚。浅部为数层扁平细胞,细胞核呈扁平或梭形,越靠近表面的细胞,结构界限越不清楚。 

二、结缔组织

1、疏松结缔组织铺片(HE染色)

    (1)肉眼观察:标本染成淡紫红色,纤维互相交织成网状。选择标本较溥的部位进行低倍观察。

    (2)低倍镜观察:可见纤维交织成网,细胞散在于纤维之间。

(3)高倍镜观察:用铺片法制片可显示两种纤维:① 胶原纤维染成淡红色,较粗,呈波浪状,常有分支;② 弹性纤维染成红色,折光性强,比胶原纤维细,末端可见卷曲,有分支。细胞散在于纤维之间,主要能分辨以下几种细胞:A.成纤维细胞:数量较多,呈星形或梭形,细胞质淡红色,细胞轮廓不甚清楚,细胞核呈椭圆形,紫蓝色。B.巨噬细胞:形态不规则,细胞质内含被吞噬的蓝色颗粒,细胞核较小,深紫蓝色。C.肥大细胞:圆形或卵圆形,胞质中充满紫色颗粒,颗粒大小不等,分布均匀。

(4)高倍镜下绘图——疏松结缔组织(主要成分),注明成纤维细胞、巨噬细胞、胶原纤维和弹性纤维。

2、血液涂片(Wright stain—瑞氏染色)

    (1)肉眼观察:确认载玻片上涂有血膜的一面。选择染色较浅的部位放到低倍镜下。

    (2)低倍镜观察:选择涂片溥、染色浅而均匀的部位进行观察。染成淡红色句号状的是红细胞,有紫蓝色细胞核的是白细胞。

    (3)高倍镜观察:进一步观察各类血细胞,将白细胞较多的部位移至视野中央,换油镜观察。

    (4)油镜观察:

①红细胞:呈圆盘形,无细胞核,染成淡红色,中央着色较浅。

②中性粒细胞:细胞质内含有细小、分布均匀的淡紫红色颗粒。细胞核分为25叶,染成紫色,叶间有细丝相连。

③嗜酸性粒细胞:细胞质内充满粗大、分布均匀的橘红色颗粒。细胞核常分成2叶,染色紫蓝色。

④嗜碱性粒细胞:数量很少,不易找到,细胞质内含有大小不等、分布不均匀的紫蓝色颗粒。细胞核S形或不规则形,染色较浅,常被颗粒掩盖。

⑤淋巴细胞:大小不等,以小淋巴细胞居多。小淋巴细胞的大小与红细胞相似。细胞核圆形或椭圆形,染成深蓝色。细胞质少,呈天蓝色。

⑥单核细胞:是血细胞中体积最大者。细胞核多呈肾形或马蹄形,常位于细胞一侧,染色比淋巴细胞的细胞核浅。细胞质较多,染成浅蓝色。

⑦血小板:为不规则形的紫蓝色小体,常聚集成群。

   5)高倍镜下绘图——各种血细胞,注明各种血细胞的名称。

三、肌组织

1、平滑肌(小肠横切片,HE染色)

    (1)肉眼观察:切片中染色最红的部分是平滑肌层。

    (2)低倍镜观察:在肌层内可见长梭形的平滑肌纤维纵切面和点状的平滑肌纤维横切面。

    (3)高倍镜观察:平滑肌纤维的纵切面呈长梭形,细胞核卵圆形,位于中央。平滑肌纤维的横切面呈大小不一的圆形,有的中央有圆形的细胞核,有的无细胞核。因为是纤维的两端断面。

2、骨骼肌(骨骼肌纵切片,HE染色)

    1)肉眼观察:切片中染成红色的长方形结构为骨骼肌的纵切面。

2)低倍镜观察:骨骼肌纤维呈细长的圆柱状,有不甚明显的明暗相间的横纹。细胞核呈扁椭圆形,染成紫蓝色,位于肌膜的深面,数量较多。

    3)高倍镜观察:肌纤维内有许多纵行排列的细丝,为肌原纤维。每条肌原纤维上的横纹部都由着色深浅不一的区域间隔排列。可观察到暗带,明带,Z线,H带。

   4)高倍镜下绘图——骨骼肌(纵切面),注明暗带,明带,Z线,H带。

四、神经组织

1、多极神经元(脊髓横切片,HE染色)

    1)肉眼观察:脊髓横切面呈圆形或椭圆形,中部着色较浅,呈蝴蝶状的部分为灰质。灰质的一端较宽,是脊髓灰质的前角。

    2)低倍镜观察:在灰质前角内的紫红色多突起细胞是多极神经元,选择一个大而突起多,有细胞核的细胞,移至视野中央,换高倍镜观察。

3)高倍镜观察:多极神经元胞体不规则,胞核大而圆,位于中央,核仁明显。胞质内充满紫蓝色块状的尼氏体。因突起都被切断,所以只能见到突起的根部,且不易区别它是树突还是轴突。

【思考题】

1、上皮组织分几类?各有什么特征?

2、骨骼肌的结构有什么?与心肌有哪些不同?

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